常见消毒剂消毒效果评价

2020-10-26 06:59:03 家禽科学 2020年9期

刘杰 韩薇 崔雪志 吴蕾 常海霞 韩帅琪 张向奎 刘振林 李文锋 李建和 李超 许传田

摘? 要:为评价规?;吵〕S孟炯恋南拘Ч?,用规?;吵》掷爰ǖ娜晗妇ù蟪Ω司?、沙门氏菌和葡萄球菌)作为标准菌株,用菌悬混合液定量杀菌法分别对13种消毒剂的杀菌效果进行比较。在相同实验室条件下,将大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌分别与消毒剂按不同稀释比例混匀后作用15 min,培养并计数杀菌后的菌落总数。结果显示:A、B、I 比例为1∶2000;C、D比例为1∶1000;H比例为1∶800;G比例为1∶600;E、F、L、M浓度为0.3%(其中L和M以碘含量计);J浓度为0.05%;K浓度为0.02%;以上浓度均可达到100%杀菌效果。

关键词:大肠杆菌;沙门氏菌;葡萄球菌;消毒剂

中图分类号:S859.79+9.1? ? 文献标识码:B? ? ?文章编号:1673-1085(2020)9-0003-05

规?;吵∫卟”⒍嗍怯捎谕饨绮≡⑸锶肭只蛘吣诨肪巢≡⑸镂廴纠┥⒃斐傻腫1],消毒能效阻断传染病病原体传播[2],通过消毒可将病原微生物隔离在养殖场和动物体外。因而选择高效安全的消毒剂产品是做好消毒工作的关键,亦是做好生物安全工作的重中之重。目前市场上消毒剂种类繁多、效果各异,养殖场人员在选择消毒剂时无所适从。本试验通过对13种消毒剂分别对大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌的杀菌效果比较,并结合每种消毒剂的使用成本和消毒机制,筛选消毒效果较好、性价比高的产品,为养殖场合理选择选消毒剂提供依据。

1? 材料与方法

1.1? 材料

1.1.1? 消毒剂及主要成分? 戊二醛苯扎溴銨溶液(A),戊二醛苯扎溴铵溶液(B),戊二醛苯扎溴铵溶液(C),复方戊二醛溶液(D),复合酚(E),复合酚(F),过硫酸氢钾复合物粉(G),过氧乙酸、过氧化氢溶液(H),戊二醛苯扎溴铵、甲醛、乙二醛(I),三氯异氰尿酸粉(J),癸甲溴铵溶液(K),10%聚维酮碘溶液(L),10%聚维酮碘溶液(M)。

1.1.2? 试验菌株? 试验用大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌均来自养殖现场。

1.1.3? 器材? MHB和平板计数琼脂均为陆桥产品;苏净牌超净工作台、一恒37 ℃恒温培养箱、申安牌高压灭菌锅、100~1000 μL单道移液器、吸头、18 mm×180 mm试管(带塞子)、酒精灯等。

1.2? 方法

1.2.1? 细菌培养? 将养殖场分离鉴定的大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌复苏后,加入到已灭菌MHB溶液,37 ℃恒温培养箱培养24 h。

1.2.2? 计算MHB溶液中菌落含量? 室温条件下(25℃)将培养24 h的MHB溶液在超净工作台中用灭菌生理盐水作10倍倍比稀释,稀释至108,再分别从已稀释好的梯度(104~108)中分别取0.1 mL菌液加入到灭菌的90 mm平皿中,倒入平板计数琼脂,凝固后置于37 ℃恒温培养箱培养18~24 h,计算三种菌株的菌落总数。

1.2.3? 消毒剂与菌悬液作用? 室温条件下(25 ℃),根据厂家推荐消毒浓度设置消毒剂的稀释比例(见表1)将A、B、C、D、G、H和I分别用蒸馏水进行1∶200、1∶400、1∶600、1∶800、1∶1000、1∶2000倍稀释;E和F作0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%、1.2%稀释;J稀释至0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%;K稀释至0.008%、0.016%、0.02%、0.035%、0.04%、0.05%;L、M稀释至0.1%、0.3%、0.5%、1%、2%(以碘含量计)。震荡混匀后,在超净工作台中将相应菌株加入到不同稀释倍数的消毒剂中,消毒剂与菌悬液的比例为10∶1(10 mL消毒剂∶1mL菌液)混合均匀,反应15 min。在超净工作台中分别取0.1 mL反应后混合液加入平皿中,倒入平板计数琼脂、混匀,凝固后倒置于37 ℃恒温培养箱中培养18~24 h,计算不同平皿中的菌落总数。试验过程中设阳性对照(灭菌蒸馏水∶菌悬液=10∶1)和阴性对照(灭菌蒸馏水)。

2? 试验结果

2.1? MHB溶液中细菌含量? 试验结果见表2。

由表2计算可知,三种菌株菌悬液中含菌量:大肠杆菌为6.8×109 CFU/mL,沙门氏菌为7.2×108 CFU/mL,葡萄球菌为4.5×108 CFU/mL。

2.2? 各种消毒剂杀菌效果? 消毒剂对三种细菌的杀菌效果见表3。结果显示,13种消毒剂的不同稀释比例对菌悬液(大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌)作用15 min,并菌落计数100 μL。A、B、I 比例为1∶2000,C、D比例为1∶1000,H 比例为1∶800,G比例为1∶600,E、F、L、M浓度为0.3%,J浓度为0.05%,K浓度为0.02%,以上浓度对三种菌均可达到100%杀菌效果。

2.3? 不同消毒剂的成本比较? 在实验室条件下,13种消毒剂推荐使用比例与市场价格计算得出其消毒成本,由低到高依次为K

3? 讨论

在实验室条件下,13种消毒剂按厂家推荐比例对大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄糖球菌均可达到100%杀菌效果。比较各种消毒剂消毒效果和成本,消毒剂K性价比较高,其主要成分为癸甲溴铵,是一种双链季铵盐消毒剂,杀菌普广,对多数细菌、真菌、病毒有杀灭效果,为中效消毒剂,无色、无味、无刺激和腐蚀性,但受有机物影响大,对芽孢和无囊膜病毒效果较差,可带禽和饮水等消毒[3,4]。

消毒剂J主要成分为三氯异氰尿酸粉,可杀灭各种微生物,主要对细菌、芽孢、病毒及真菌杀菌作用强,属于高效消毒剂;但其药效持续时间较短,有较强的刺激性和腐蚀性,种禽场多用于空舍期及其车辆消毒[5]。

消毒剂A、B、C、D、I主要消毒成分为戊二醛苯扎溴铵或者复方戊二醛,均为醛类消毒剂,杀菌作用和渗透力强, 对任何细菌、病毒、霉菌及顽固的芽孢等有杀灭作用, 可用于空栏、用具、运输车辆等的消毒, 还可用于熏蒸消毒[6];受温度和有机物影响较小,主要用于禽舍、器具喷雾等消毒。

消毒剂E和F成分是复合酚,为酚类消毒剂,通过使病原微生物蛋白变性、沉淀达到消毒效果,杀菌普广,但有臭味和刺激性[7],所以主要用于墙壁、地面、外环境和用具消毒。

消毒剂L和M主要成分为聚维酮碘,可杀死大部分细菌、真菌和病毒[8],杀菌快且效力强,但使用浓度较高、不溶于水、有残留、受有机物影响较大,主要用于带畜禽消毒、饮用水消毒等。

消毒剂G成分为过硫酸氢钾复合物粉,是一种广谱、高效、低毒兽用消毒剂[9],主要用于畜禽舍水线和带畜禽消毒。

消毒剂H主要成分为过氧乙酸和过氧化氢,杀菌普广、高效、环保,可以迅速杀灭大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等微生物[10],主要用于畜禽圈舍和设备表面消毒。

本实验数据是在实验室条件下所得,养殖场在实际消毒过程中,因消毒对象、温度、湿度、作用时间、消毒方式、有机物及污染程度等因素都会对消毒效果产生一定的影响;因此养殖现场选择消毒剂要根据消毒对象选择适当类型消毒剂,并根据消毒条件调整消毒剂使用比例,以达到理想消毒效果。

参考文献:

[1]? 陈晓强王晶钰,张中航,等.规?;Τ∠炯恋纳秆∮胂拘Ч兰踇J].动物医学进展,2011,32(11):85-89.

[2]? 董雯雯,李峰,张世栋,等.家禽养殖场常用消毒剂及消毒效果评价方法研究进展[J].家禽科学,2019(09):53-56.

[3]? 邹立扣,吴国艳,程琳,等.季铵盐类消毒剂及大肠杆菌对其耐药性研究进展[J].食品科学,2014,35(17):338-345.

[4]? 王铁良.鸡场消毒措施及注意事项[J].中国畜牧兽医文摘,2017,33(02):95.

[5]? 容庭,刘志昌,余苗,等.养殖场如何正确选择消毒药[J].广东畜牧兽医科技,2018,43(06):23-25+44.

[6]? 黄勇.疫病防控中消毒剂的选择和使用[J].中国畜禽种业,2010,6(10):40-42.

[7]? 张波.畜禽养殖场消毒剂的选择[J].畜牧兽医科技信息,2016(08):47-48.

[8]? 佟海山,陈遇英.我国兽用消毒剂的应用现状与对策[J].中国兽医杂志,2017,53(09):115-117.

[9]? 杨绒娟,李朋朋,周德刚.过硫酸氢钾复合物粉对不同菌株的消毒效果研究[J].安徽农业科学,2020,48(14):85-87.

[10]? 王歡欢,王家新,郑鹏,等.过氧乙酸和来苏尔对大肠杆菌杀灭效果的比较研究[J].上海畜牧兽医通讯,2019(05):42-45.

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